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    研域解析ELISA中的“45加樣”

    發布時間: 2019-03-13  點擊次數: 155次

    在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。

     

    加標本一般用微量加樣器,按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。

     

    那么在ELISA中除了包被外,一般需進行45加樣。其中“45加樣”是什么意思?這里的45加樣,應當為45度加樣,即加樣槍的吸頭所在的直線應當與板條所在的直線呈45度角。

     

    正確的加樣方法應為45度,吸頭貼著孔壁加入,應注意:

    (1)角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導致加樣不準確!

    (2)吸頭應當貼著管壁和液面的交界處!      

     

    在ELISA中加樣還要注意如下問題:

    1. 吸取樣品時,加樣槍吸頭不應黏附多余的液體;加樣時不可90度向孔中滴加液體,這樣會導致液體殘留在吸頭上,加樣不準確!

    2. 不要將吸頭伸入孔中,一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭,另一方面可能會將孔中的液體吹起來,加樣不準確!

           

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